號外號外——科佰重磅推出IHC參考品

發(fā)布時(shí)間:2024/09/06分類(lèi):技術(shù)文章來(lái)源:科佰生物

背景

Claudin18.2(CLDN18.2)是Claudin蛋白質(zhì)家族的一員，位于細胞膜表面，正常情況下僅低水平表達于胃粘膜分化上皮細胞，但在病理狀態(tài)下，Claudin18.2在多種腫瘤中有的表達顯著(zhù)上調，包括80%的胃腸道腺瘤、60%的胰腺腫瘤。此外，CLDN 18.2活化還可見(jiàn)于食管癌、卵巢癌和肺腺癌中，因此是具有潛力治療癌癥的熱門(mén)靶點(diǎn)。目前被批準進(jìn)入臨床試驗的靶向藥物主要有四類(lèi)：?jiǎn)慰寺】贵w、ADC、CAR-T和雙特異性抗體(BsAb)，靶向Claudin18.2單抗、ADC、BsAb和CAR-T療法主要以IHC篩查腫瘤Claudin18.2陽(yáng)性/高表達患者為基礎。目前的多項臨床試驗結果提示靶向Claudin18.2療法對IHC檢測Claudin18.2陽(yáng)性率更高的癌癥患者亞群療效更好。

目前Claudin18.2的檢測沒(méi)有判讀金標準，其判讀標準在不同的研究中各有不同。由于Zolbetuximab是唯一進(jìn)入III期臨床的藥物，很多藥物參考它的陽(yáng)性結果作為入組標準。

①判斷CLDN18.2蛋白在腫瘤細胞膜染色的強度，以及完整、基底外側或外側膜染色的癌細胞百分比。

②CLDN18.2陽(yáng)性：在≥40%的腫瘤細胞中，任何染色強度為2+或3+(總數)的腫瘤。

因此，通過(guò)IHC精準地篩查Claudin18.2表達，對于臨床試驗數據的可靠性以及精準醫療的有效性是至關(guān)重要的。

實(shí)驗流程

自20 世紀中開(kāi)始，免疫組織化學(xué)（immunohistochemistry，IHC）技術(shù)開(kāi)始登上了臨床病理診斷的舞臺。如今，IHC檢測已經(jīng)成為一種必不可少的技術(shù)手段，在病理診斷中扮演著(zhù)重要的角色，尤其體現在腫瘤的診斷中。然而，IHC 方法猶如一把雙刃劍，如果因為質(zhì)控不合格，會(huì )造成假陽(yáng)性或假陰性而導致病理的誤診和漏診，給予臨床錯誤的信息，最終耽誤患者的治療而造成嚴重后果。因此，在免疫組化染色過(guò)程中設立對照是進(jìn)行染色質(zhì)量控制的最重要的措施之一，尤其是陰性和陽(yáng)性對照。

在2014和2015年，國際特設專(zhuān)家委員會(huì )對診斷免疫組化對照的分類(lèi)及標準定義、陰性對照結果判讀及選擇應用等方面提出專(zhuān)家推薦意見(jiàn)。

基于目前的IHC在臨床病理診斷中的重要作用，建立科學(xué)規范、精細化的免疫組化質(zhì)量控制體系就顯得尤為重要。良好的免疫組化染色切片是正確判斷染色結果的基礎和前提。由于免疫組化染色過(guò)程中存在很多步驟或環(huán)節，每一個(gè)步驟或環(huán)節都可能影響到染色的最終結果。

科佰生物選擇了CLDN18.2作為研究對象，重磅推出蠟塊和撈片兩款標準品。

科佰生物

針對IHC過(guò)程的質(zhì)控，科佰現推出IHC標準品：

IHC是依據抗原與抗體特異性結合的原理，通過(guò)化學(xué)反應使標記抗體的顯色劑顯色來(lái)確定組織細胞內抗原，對其進(jìn)行定位、定性及相對定量的研究。IHC 全流程質(zhì)控包括了檢測前的準備、實(shí)驗檢測過(guò)程、檢測后結果的判讀三部分。其中的每個(gè)細節都可能會(huì )影響到IHC 染色質(zhì)量。針對這3個(gè)部分，科佰做了充分的質(zhì)量控制。

1、針對檢測前的質(zhì)量控制：

一個(gè)好的IHC對照，細胞的Claudin18.2表達量非常重要。科佰采用FACS檢測Claudin18.2蛋白的表達，選擇了不同表達量的細胞作為樣本。

2、針對檢測中和檢測后的質(zhì)量控制：

IHC的核心原理就是抗原抗體的特異性反應，因此一個(gè)優(yōu)質(zhì)的抗體是保證檢測結果的重要因素，科佰選用Anti-Claudin18.2 antibody
[EPR19202] (ab222512)，該抗體為藥企/診斷公司開(kāi)發(fā)相應的（伴隨）診斷/檢測試劑提供了重要參考，報告涵蓋結腸癌、胃癌、胰腺癌、食管癌各超過(guò)100例樣本。免疫組化試劑盒選用servicebio (G1215)，該試劑盒為高靈敏度的兩步法免疫組化試劑盒。

在檢測后的IHC結果判讀，科佰參考免疫組化判讀標準將IHC結果分類(lèi)：

無(wú)著(zhù)色或≤10%的浸潤癌細胞呈現不完整的、微弱的細胞膜染色為陰性(0)；

>10%的浸潤癌細胞呈現不完整的、微弱的細胞膜染色為陰性(1＋)；

>10%的浸潤癌細胞呈現不完整的和/或弱～中等強度的細胞膜染色，或≤10%的浸潤癌細胞呈現強而完整的細胞膜染色為不確定(2＋)；

>10%的浸潤癌細胞呈現強、完整、均勻的細胞膜染色為陽(yáng)性(3＋)

免疫組化檢測過(guò)程中存在一定的假陽(yáng)性，假陰性，同一組織相同抗原在不同批次實(shí)驗中的結果可能存在差異，科佰推出的IHC標準品，可以評估實(shí)驗結果的有效性以及合理性，提高免疫組化檢測的準確性，用于篩選Claudin18.2陽(yáng)性表達，服務(wù)于靶向Claudin18.2治療。