TPR-MET/BaF3
CBP73365
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產(chǎn)品描述
產(chǎn)品數據庫
| I. Background | |
| 受體酪氨酸激酶(RTKs)是跨膜蛋白，在信號通路的啟動(dòng)和調節中起重要作用。大多數 RTK 在細胞外配體結合時(shí)被激活，促進(jìn)細胞內磷酸化的傳遞，從而驅動(dòng)信號傳導。 MET 是一種受體酪氨酸激酶(RTK)，參與發(fā)育和傷口修復的信號通路。MET 的激活依 賴(lài)于配體與細胞外受體的結合，從而促進(jìn)二聚化、細胞內磷酸化和相關(guān)信號蛋白的募集。 c-MET 是肝細胞生長(cháng)因子(HGF)酪氨酸激酶受體，MET 與 HGF 結合后，發(fā)生自身磷酸化并 激活下游 PI3K/AKT、RAS-MAPK、β-catenin 信號通路等多條信號通路，從而發(fā)揮其促細 胞增殖、細胞生長(cháng)、細胞遷移、侵襲血管及血管生成等效應，在組織正常發(fā)育和腫瘤進(jìn)展 中發(fā)揮關(guān)鍵作用。HGF/MET 通路異常與腫瘤的發(fā)生和轉移相關(guān)并誘導耐藥性的產(chǎn)生，包 括 MET 基因重排、基因突變、基因擴增和過(guò)表達。 TPR-MET 重排是由 1 號染色體上的 TPR(易位啟動(dòng)子區)位點(diǎn)與染色體上的 MET 位點(diǎn) 衍生的序列的 5 '區域融合引起的。融合分子 TPR-MET 包含 cMET 原癌基因的酪氨酸激酶 結構域，TPR 序列由組成啟動(dòng)子和開(kāi)放閱讀框組成。它不需要依賴(lài) HGF 的刺激下其激酶活 性持續很高，并且本身的酪氨酸呈現被磷酸化狀態(tài)，從而引起 MET 信號通路的異常激活 和細胞增殖、運動(dòng)及血管和其他腫瘤微環(huán)境狀態(tài)的改變，最終成為腫瘤發(fā)生和進(jìn)展的驅動(dòng) 因素。 致癌突變的激活也可以發(fā)生在 MET 的其他結構域，包括酪氨酸激酶結構域(TKD)，導 致與配體無(wú)關(guān)的受體磷酸化和信號傳導。在約 13-20%的Ⅰ型乳頭狀腎細胞癌(pRCC)中發(fā) 現 MET TKD 的激活遺傳性或散發(fā)性點(diǎn)突變，并通過(guò)影響激活環(huán)的構象、促進(jìn)激酶結構域 磷酸化和促進(jìn)下游致癌信號級聯(lián)反應導致 MET 受體的組成性激活。在 pRCC 中發(fā)現的 MET 激活突變的種類(lèi)包括:V1092I (V1110)、H1094Y/R/L (H1112)、H1124D (H1142)、 L1195F/V (L1213)、F1200I (F1218)、V1188L (V1206)、Y1220I (Y1238)、D1228H/N (D1246)、Y1230C/D/H (Y1248)、M1131T (M1149)和 M1250T (M1268)。這些激活的 MET 突變也可以引起對 MET TKIs 的抗性，從而引起對 MET TKI 的獲得性耐藥。 |
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| II. Description | |
BaF3（小鼠原 B 細胞）的生長(cháng)和增殖需要 IL-3 的維持。通過(guò)引入各種表達激酶的基因， 能作為 BaF3 的驅動(dòng)基因，讓 BaF3 不再依賴(lài) IL-3 而增殖，進(jìn)而激酶基因成為 BaF3 增殖依 賴(lài)的驅動(dòng)基因，用于評估小分子藥物對激酶的靶向抑制作用，原理及流程見(jiàn)下圖所示。 Figure 1. TPR-MET BaF3 細胞的構建原理圖 |
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| III. Introduction | |
| Cell Line Name： | TPR-MET/BaF3 |
| Host Cell: | Ba/F3 |
| Stability: | 16 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.) |
| Freeze Medium: | 90% FBS+10% DMSO |
| Complete Culture Medium: | RPMI-1640+10%FBS+2μg/ml puromycin |
| Mycoplasma Status: | Negative |
| IV. Representative Data | |
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1.WB of TPR-MET/BaF3
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2.Sanger of TPR-MET/BaF3
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3. Anti-proliferation assay
Figure 4. CTG Proliferation Assay of TPR-Met BaF3 Cell (C1). |
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