EML4-ALK V1 [G1202R]/BaF3
CBP73200
詢(xún) 價(jià)
留 言
產(chǎn)品描述
產(chǎn)品數據庫
| I. Background | |
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棘皮微管相關(guān)蛋白（Echinoderm microtubule-associated protein，EMAP）在海膽中表達， 是第一個(gè)被鑒定的 EMAP 樣蛋白(EML)家族成員。它是海膽卵微管（MT）制劑的主要成分， 也被發(fā)現在間期和有絲分裂時(shí)與微管蛋白共定位。
ALK 是胰島素受體超家族的一員，首次在間變性大細胞淋巴瘤中通過(guò)與核磷蛋白 （NPM）融合發(fā)現。癌細胞中的 ALK 信號傳導通過(guò)三種主要機制發(fā)生：基因融合、基因 擴增和點(diǎn)突變。 在肺癌中檢測到的第一個(gè)致癌融合是 EML4-ALK，由 2 號染色體短臂上的一個(gè)小倒位 產(chǎn)生，促進(jìn) EML4 N 末端與 ALK（外顯子 20）的融合。一旦 EML4 中的斷點(diǎn)出現在不同 的外顯子（2、6、13、14、15、18 和 20）中，EML4-ALK 融合蛋白就會(huì )呈現多種變體。 其中 EML4-ALK 融合中最常見(jiàn)的變體亞型為 V1 和 V3a/b，約占所有 EML4-ALK 融合突變 的 70%。不同 EML4-ALK 變體的表達可能會(huì )影響對 ALK TKI 的反應，從而影響繼發(fā)性耐 藥特異性 ALK 突變的發(fā)展傾向。EML4 與 ALK 激酶結構域的融合導致異常信號傳導，從 而增加細胞生長(cháng)、增殖和細胞存活。在 NSCLC 患者的 ALK 中檢測到的點(diǎn)突變約占觀(guān)察到 的耐藥機制的三分之一，其中最常見(jiàn)的是 p.L1196M（類(lèi)似于 EGFR 的 p.T790M）。其他確 定的突變有 p.1151Tins、p.L1152R、p.C1156Y、p.I1171T、p.F1174L、p.V1180L、p.G1202R、 p.D1203N、p.S1206Y 和 p.G1269A 。這些突變增加了酪氨酸激酶受體與 ATP 的親和力，降 低了 TKI 的結合親和力。ALK 基因突變，例如 p.1151Tins 和 p.G1202R，導致對第二代 ALK TKI 產(chǎn)生耐藥性；p.L1196M 和 p.L1152R 賦予對第二代和第三代 ALK TKI 的敏感性； p.G1202R 導致對第一代和第二代 ALK TKI 產(chǎn)生耐藥性。 |
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| II. Description | |
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BaF3（小鼠原 B 細胞）的生長(cháng)和增殖需要 IL-3 的維持。通過(guò)引入各種表達激酶的基因， 能作為 BaF3 的驅動(dòng)基因，讓 BaF3 不再依賴(lài) IL-3 而增殖，進(jìn)而激酶基因成為 BaF3 增殖依 賴(lài)的驅動(dòng)基因，用于評估小分子藥物對激酶的靶向抑制作用，原理及流程見(jiàn)下圖所示。
 Figure 1. EML4-ALK V1 [G1202R] BaF3 細胞的構建原理圖 |
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| III. Introduction | |
| Cell Line Name： | EML4-ALK V1 [G1202R]/BaF3 |
| Host Cell: | Ba/F3 |
| Stability: | 16 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.) |
| Application: | Anti-proliferation assay and PD assay |
| Freeze Medium: | 90% FBS+10% DMSO |
| Complete Culture Medium: | RPMI-1640+10%FBS |
| Mycoplasma Status: | Negative |
| IV. Representative Data | |
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1.WB of EML4-ALK V1 G1202R/BaF3
Figure 2. WB of EML4-ALK V1 G1202R/BaF3. |
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2. Sanger Sequencing of EML4-ALK v1 Fusion
Figure 3. Sanger sequencing of EML4-ALK v1 Fusion
Figure 4. Sanger sequencing of ALK v1 G1202R (c.3604G>A) |
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3. Anti-proliferation assay
Figure 5. CCK8 Proliferation Assay of EML4-ALK v1 [G1202R] BaF3(C5). |
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