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GPR34 β-Arrestin CHO

CBP71514

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I. Background
     G 蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)是跨膜蛋白受體,其特征是配體數(shù)量可變,包括內源性神 經遞質和激素,也包括外源性天然和人工化合物。激動劑與受體結合后會觸發(fā)信號通路的 激活;而拮抗劑則會阻礙激動劑介導的受體激活。反向激動劑除像拮抗劑一樣干擾激動劑 外,還會抑制受體的組成活性。

      GPR34 是 GPCR 家族中的一員,作為跨膜信號轉導受體,GPR34 在免疫調節(jié)、神經炎 癥及腫瘤微環(huán)境中扮演多重角色,近年來逐漸成為基礎研究與藥物開發(fā)的熱點靶點。目前 已知的主要內源性配體為溶血磷脂酰絲氨酸(lysoPS),一種在細胞凋亡或激活過程中釋 放的脂質信號分子。lysoPS 通過疏水口袋與 GPR34 結合,激活下游信號通路。此外,研究 提示可能存在其他配體或共受體協(xié)同調控其功能,如某些病原相關分子模式(PAMPs)或 腫瘤微環(huán)境中的特定代謝物。
 
II. Description
      GPR34 β-Arrestin CHO 報告基因藥靶模型很好的模擬了體內 GPR34/β-Arrestin 的信號 轉導過程,原理見下圖所示。當缺乏配體刺激時,β-Arrestin 不與 GPR34 結合,融合β- Arrestin 的熒光素酶處于失活構象,當 GPR34 遭遇配體刺激時,融合熒光素酶報告基因的 β-Arrestin 被招募,使熒光素酶報告基因處于激活狀態(tài),加入其底物后發(fā)光信號增強。



Figure 1. GPR34 β-Arrestin CHO 細胞模型原理圖
 
III. Introduction
Host Cell:

CHO

Stability: 20 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.)
Freeze Medium: 90% FBS+10% DMSO
Culture Medium: F12K+10%FBS+5 μg/ml Puromycin+5 μg/ml Blasticidin
Mycoplasma Status: Negative
Storage: Liquid nitrogen immediately upon delivery
Application(s):

Functional assay for GPR34

Assay Format: β-arrestin
 
IV. Description of Host Cell Line
Organism: Hamster
Tissue: Ovary
Morphology: Epithelial
Growth Properties: Adherent
 
V. Representative Data

Figure 2. Recombinant GPR34 β-Arrestin CHO stably expressing GPR34.

Figure 3. Dose Response of 18:1 Lyso PS in GPR34 β-Arrestin CHO (C35).


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