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EGFR WT (EGF Dependent) BaF3

CBP73399

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I. Background

      EGFR(Epidermal Growth Factor Receptor)是上皮生長(zhǎng)因子(EGF)細(xì)胞增殖和信號(hào) 傳導(dǎo)的受體,EGFR 是一種糖蛋白,屬于酪氨酸激酶型受體,位于細(xì)胞膜表面,靠與配體 結(jié)合來(lái)激活。EGFR 與腫瘤細(xì)胞的增殖、血管生成、腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移及細(xì)胞凋亡的抑制有 關(guān)。EGFR 基因突變是預(yù)測(cè) NSCLC 患者使用 EGFR-TKIs 療效的重要靶標(biāo)。

      EGFR 酪氨酸激酶區(qū)域的突變主要發(fā)生在 18-21 外顯子,其中 19 號(hào)和 21 號(hào)外顯子突 變覆蓋突變的 90%。EGFR 突變主要包括 4 種類(lèi)型:外顯子 19 缺失突變、外顯子 21 點(diǎn)突 變、外顯子 18 點(diǎn)突變和外顯子 20 插入突變。最常見(jiàn)的 EGFR 突變?yōu)橥怙@子 19 缺失突變 和外顯子 21 點(diǎn)突變,二者均會(huì)導(dǎo)致酪氨酸激酶結(jié)構(gòu)域活化。EGFR 基因突變可以分為兩大 類(lèi),一個(gè)是藥物敏感突變,也就是突變后可以使用某種靶向藥物(如 19 缺失,L858R 突 變),另一個(gè)是耐藥突變,即突變后對(duì)某種靶向藥物耐藥(如 T790M 突變)。

 
II. Background

      BaF3(小鼠原 B 細(xì)胞)的生長(zhǎng)和增殖需要 IL-3 的維持。通過(guò)引入各種表達(dá)激酶的基因, 能作為 BaF3 的驅(qū)動(dòng)基因,讓 BaF3 不再依賴 IL-3 而增殖,進(jìn)而激酶基因成為 BaF3 增殖依 賴的驅(qū)動(dòng)基因,用于評(píng)估小分子藥物對(duì)激酶的靶向抑制作用,原理及流程見(jiàn)下圖所示。
 


Figure 1. 
EGFR WT (EGF Dependent) BaF3 細(xì)胞的構(gòu)建原理圖

 
III. Introduction
Cell Line Name: EGFR WT (EGF Dependent) BaF3
Host Cell: BA/F3
Stability: 16 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.)
Application: Anti-proliferation assay and PD assay
Freeze Medium: 90% FBS+10% DMSO
Complete Culture Medium: RPMI-1640+10%FBS+100 ng/ml EGF
Mycoplasma Status: Negative
 
IV. Representative Data



Figure 2. Recombinant EGFR WT (EGF Dependent) BaF3 constitutively expressing EGFR.

Figure 3. CTG proliferation Assay of EGFR WT (EGF Dependent) BaF3(C11).


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