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ISRE-Luc/Raw264.7

CBP74098

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產(chǎn)品描述
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I. Background
      干擾素(IFN)是一種由單核細胞和淋巴細胞產(chǎn)生的具有多種功能的可溶性糖蛋白,是先天和適應性免疫的關(guān)鍵效應分子。IFN 細胞因子根據其結合的不同干擾素受體分為三種類(lèi)型:I 型、II 型和 III 型。Ⅰ型干擾素的分類(lèi)較多,包括 IFN-α、IFN-β、IFN-δ、IFN-κ、IFN-ω、IFN-τ、IFN-ε、IFN-ξ 等;Ⅱ型干擾素為 IFN-γ;Ⅲ型干擾素即 IFN-λ,包括IFN-λ1、IFN-λ2 及 IFN-λ3。Ⅰ型干擾素主要功能是抗病毒及抗腫瘤,Ⅱ型干擾素主要功能是誘導主要組織相容性復合體(MHC)類(lèi)抗原的表達和免疫調節效應,但其抗病毒作用比Ⅰ型干擾素弱。Ⅲ型 INF 為 2003 年發(fā)現的一種新型干擾素,具有廣譜的抗病毒及免疫調節活性。
 
      配體結合后,I 型和 II 型受體均被激活,導致受體亞基二聚化和重排,從而通過(guò)自身磷酸化激活相關(guān) JAK,并進(jìn)一步激活 STAT 蛋白。磷酸化后,激活的 STAT 形成同型二聚體,然后轉位到細胞核中,在那里啟動(dòng) IFN 刺激基因的轉錄。
 
      I 型干擾素還可誘導 ISGF3 復合物的形成,該復合物由 STAT1、STAT2 和 IRF9 組成。ISGF3 復合物與 ISRE(干擾素刺激反應元件)結合,進(jìn)一步誘導啟動(dòng)子內含有 ISRE 的干擾素刺激基因的轉錄。
IFNγ 與 IFNγ 受體結合導致下游 STAT1 在 Tyr701 位點(diǎn)發(fā)生酪氨酸磷酸化。產(chǎn)生磷酸化的 STAT1 同型二聚體轉位至細胞核并與 GAS(IFNγ 激活位點(diǎn))元件結合,從而誘導 IFNγ 調控基因的表達。
 
II. Description
      ISRE-Luc RAW264.7 報告基因細胞是由 ISRE 調控并表達 Luc 熒光素 酶報告基因的 RAW264.7細胞。RAW264.7 是小鼠巨噬細胞的常用模型,用于研究細胞對微 生物及其產(chǎn)物的反應。RAW 264.7 衍生細胞內源性表達許多 PRR,包括 toll 樣受體 (TLR)、 NOD 樣受體 (NLR)、RIG-I 樣受體 (RLR) 和 C 型凝集素受體 (CLR)。STING 激活的 原理見(jiàn)下圖所示
 



Figure 1:ISRE-Luc THP-1 細胞模型原理圖
 
III. Introduction
Host Cell: Raw264.7
Expressed gene: ISRE
Stability: 32 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.)
Freeze Medium: 90% FBS+10% DMSO
Culture Medium: DMEM+10%Heat Inactivated-FBS+200 μg/ml Zeocin+100 μg/ml Normocin
Mycoplasma Testing: Negative
Storage: Liquid nitrogen
Application(s): Functional(Report Gene) Assay
 
IV.. Description of Host Cell Line
Organism: Mus musculus, mouse
Tissue: Abelson murine leukemia virus-induced tumor; ascites
Disease: Abelson murine leukemia virus-induced tumor
Morphology: Monocyte/macrophage
Growth Properties: Adherent
 
V. Representative Data

Figure 2. Detect Luciferase assay by Ultra Luciferase Detection Kit CBPH0001(we strongly suggest to purchase from Cobioer).  Dose Response of 2'3-cGAMP in ISRE-Luc RAW264.7(C1).

 

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